| Konzentrationsbestimmungen von Nukleinsäuren mittels
UV-Photometer |
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| DNA |
µg/ml=OD260 * 50 µg/ml * VF |
| RNA |
µg/ml=OD260 * 40 µg/ml * VF |
| Oligo-Nucleotide |
µg/ml=OD260 * 33 µg/ml * VF |
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| mit OD260 (optische Dichte) Extinktion bei 260 nm,
VF=Verdünnungsfaktor. |
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| Berechnung der molekularen Verhältnisse von Insert und
Vektor (Rahmen, Plasmid) bei Ligationen. |
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| x µg DNA=0.662 * y kb=1 pmol |
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| x=Menge DNA in µg die 1pmol entspricht,
y=Größe der DNA in kb. |
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| BEISPIEL: |
| Ein Vektor ist 3 kb groß, dann ergibt sich: 0.662 *
3=2, d.h. 2 µg des Vektors entsprechen 1 pmol. |
| Oder ein Insert ist 300 bp groß, dann ergibt sich:
0.662 * 0.3=0.2 µg, d.h. 200 ng des Insert entsprechen 1 pmol. (P.S. 0.662
sind etwa 2/3, d.h. Größe in kb mal 2 nehmen und durch 3 teilen).
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| Berechnung der Template DNA bei einer PCR |
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| DNA Kopienanzahl beim humanen haploiden Genom beträgt
etwa 3*109 bp (3 Milliarden). Daraus folgt: |
| 1 Kopie entspricht dann 3,21 pg bzw. |
| 1 ng entspricht 312 Kopien. |
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| Humane Mitochondrien besitzen ein ringförmiges Genom
von etwa 16500 bp. Daraus folgt: |
| 1 Kopie entspricht dann 17,6 ag |
| 1 ng entspricht 5,7 107 Kopien |
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| Größenangaben beim Northern-Blot: |
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| die S28 Bande entspricht etwa 4.5 kb |
| die S18 Bande entspricht etwa 1.6 kb. |
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| Vorsilben für Potenzen der Zahl Zehn: |
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| z: |
Zepto |
(1*10-21) |
| a: |
Atto |
(1*10-18) |
| f: |
Femto |
(1*10-15) |
| p : |
Pico |
(1*10-12) |
| n : |
Nano |
(1*10-9) |
| µ : |
Mikro |
(1*10-6) |
| m : |
Milli |
(1*10-3) |
| c : |
Centi |
(1*10-2) |
| d : |
Dezi |
(1*10-1) |
| k : |
Kilo |
(1*10 3) |
| G: |
Giga |
(1*10 6) |
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